CRISPR基因編輯平臺
為CRISPR基因編輯提供一系列專業的解決方案
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什么是CRISPR?
CRISPR是Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats的縮寫,中文意思為規律間隔成簇短回文重復序列。
在自然界中,CRISPR在細菌的免疫系統中起到非常重要的作用。當病毒入侵細菌時,細菌中的分子機制會將病毒的部分序列插入到CRISPR位點中。當病毒再次入侵時,CRISPR位點會進行轉錄和加工。加工后的CRISPR RNA會與Cas蛋白形成核糖核蛋白復合物,對病毒的基因組進行“掃描”。當發現與CRISPR RNA互補配對的片段后便會結合,Cas蛋白會進行切割,以達到免疫的目的。
在許多基因組工程運用中,我們使用的是源于 Streptococcus pyogenes 的 Cas9 蛋白,CRISPR RNA則由人工合成的gRNA代替。gRNA與基因組目標位點的結合還同時取決于位于目標位點下游的一段前間隔序列鄰近基序(PAM)的存在。其中,PAM 序列所在的 DNA 單鏈與 gRNA 所結合的 DNA 單鏈是兩條不同的鏈。源于不同原核生物的 Cas 蛋白識別不同的 PAM 序列。我們最常用的 Cas9 蛋白識別的 PAM 序列是 5'-NGG-3',其中 N 代表任意核苷酸。
如果 PAM 序列匹配正確,并且 gRNA 成功地與目標位點結合,那么 Cas9 會在 PAM 序列上游約 3-4 個核苷酸進行 DNA 雙鏈的切割。
CRISPR入門指南
了解更多有關CRISPR的知識
代謝途徑分析
我能否闡明這些基因或基因途徑是否與特定的生物學結果或疾病有關?
是的,您可以利用CRISPR加速您的代謝途徑分析研究。我們通過提供前沿產品來敲除人類編碼基因,使工作流程更容易。
篩選和靶向ID
我能否快速準確地在全基因組范圍內進行高通量敲除的CRISPR篩選?
是的,我們為您的篩選工作流程提供解決方案,從方法優化到目標驗證,從而實現可靠的目標發現。
靶點確證
我能否確認特定基因在多種生物樣本和細胞類型中都參與了疾病病因或途徑?
是的,CRISPR基因編輯是一種精確,可靠且簡便的工具,可幫助您直接驗證各種樣品和細胞類型的目標。
疾病模型
我可以在CRISPR疾病模型研究中檢測或模擬基因突變嗎?
是的,我們的CRISPR解決方案是疾病模型研究的有力工具,可以了解特定基因或一組基因對復雜疾病的影響。
診斷
我可以通過CRISPR技術在患者樣本中檢測致病基因嗎?
是的,CRISPR技術被常常用作檢測感染性或非感染性疾病中涉及核酸的診斷工具。
安全
我可以通過操縱基因功能來評估藥物的安全性嗎?
是的,CRISPR技術使得評估細胞或動物模型中正在開發的藥物的毒性變得更加簡單。
為什么選擇化學合成的sgRNAs?
sgRNA序列首先被克隆到質粒載體中,然后通過轉染引入細胞,這適用于高通量基因編輯。這是最原始的方法,在基因編輯實驗之前需要一周以上的準備時間。
sgRNA首先通過RNA聚合酶從DNA模板轉錄。然后在實驗之前需要進行額外的純化。通常,制作體外轉錄(IVT)sgRNA需要大約3天的時間。
sgRNA通過化學方法直接合成。研究表明,與質粒和IVT sgRNA相比,化學合成的sgRNA具有更穩定的編輯效率和更低的脫靶效應。
CRISPR基因敲除
了解如何開展一個成功的CRISPR實驗
CRISPR篩選技術
基因組篩選是一種在系統水平上理解生物途徑的有力工具。通過篩選,研究人員能夠操縱基因來調節功能喪失和功能獲得突變。CRISPR篩選技術可以被應用于這一領域,并且在藥物發現過程中發揮著重要作用。
CRISPRa和CRISPRi
CRISPRa(CRISPR激活)和CRISPRi(CRISPR干擾)是CRISPR的兩種變體,通過酶缺陷型Cas9(dCas9)與轉錄效應子融合得到。盡管dCas9不能進行DNA切割,但gRNA仍然能夠將其導航到靶位點,使得效應子可以激活或抑制特定基因的表達。
CRISPR成像技術
雖然CRISPR因其基因編輯能力而獲得了極大的普及,但還有其他鮮為人知的CRISPR應用,例如成像也越來越受歡迎??茖W家可以使用基于CRISPR的成像技術來可視化DNA并實時跟蹤感興趣的基因組位點,當前的主要研究領域是染色質重塑和端粒健康。
Prime Editing
Prime Editing是一種新的基因編輯方法,可以精確地執行有針對性的短鏈插入、缺失和堿基交換。傳統的CRISPR基因編輯技術和Prime Editing之間的關鍵區別在于,后者可以進行更有針對性的編輯,而不會產生雙鏈DNA斷裂。
如果您有任何關于CRISPR的問題,都歡迎與我們交流,期待您的留言!
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